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猪囊尾蚴抗原基因6H的克隆、表达及鉴定

汪秀琴,  包怀恩,  沈继龙,  姚涌

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文章导航 > 中华疾病控制杂志  > 2009 >  13(3): 317-319
汪秀琴, 包怀恩, 沈继龙, 姚涌. 猪囊尾蚴抗原基因6H的克隆、表达及鉴定[J]. 中华疾病控制杂志, 2009, 13(3): 317-319.
引用本文: 汪秀琴, 包怀恩, 沈继龙, 姚涌. 猪囊尾蚴抗原基因6H的克隆、表达及鉴定[J]. 中华疾病控制杂志, 2009, 13(3): 317-319.
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猪囊尾蚴抗原基因6H的克隆、表达及鉴定

  • 1. 贵阳医学院病原生物学教研室

  • 2. 安徽医科大学人兽共患病研究所

  • 3. 安徽医科大学病原生物学教研室

基金项目: 安徽省高等学校青年科研资助项目(2002jq136)；
详细信息

  • 中图分类号: R392

    摘要
  • 摘要: 目的为寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子奠定基础。方法设计合成引物,用PCR法从cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴抗原6H基因编码序列,将其克隆入PMD-18T载体,然后在原核表达载体PET-28a中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot观察表达结果。结果用PCR法扩增出一条大小约774bp的特异性片段,克隆质粒PMD-18T-6H和原核表达质粒PET-28a-6H作BamHⅠ和XhoⅠ双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约33kDa大小的融合蛋白条带,Western blot结果显示其可与猪囊尾蚴病人血清起反应。结论本实验成功地克隆了猪囊尾蚴抗原6H编码基因,并在原核细胞中进行了表达及鉴定,为进一步免疫诊断研究奠定了基础。
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