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胶体金探针对HBV全基因转染滋养细胞中HBsAg的示踪研究

张磊,  邵晨,  邵中军,  张景霞,  卢娟,  门可,  闫永平,  徐德忠

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文章导航 > 中华疾病控制杂志  > 2010 >  14(2): 99-103
张磊, 邵晨, 邵中军, 张景霞, 卢娟, 门可, 闫永平, 徐德忠. 胶体金探针对HBV全基因转染滋养细胞中HBsAg的示踪研究[J]. 中华疾病控制杂志, 2010, 14(2): 99-103.
引用本文: 张磊, 邵晨, 邵中军, 张景霞, 卢娟, 门可, 闫永平, 徐德忠. 胶体金探针对HBV全基因转染滋养细胞中HBsAg的示踪研究[J]. 中华疾病控制杂志, 2010, 14(2): 99-103.
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胶体金探针对HBV全基因转染滋养细胞中HBsAg的示踪研究

  • 1. 第四军医大学流行病学教研室

  • 2. 第四军医大学西京医院泌尿外科

基金项目: 国家自然科学基金重点课题(30230320)； 陕西省自然科学基金(2006C248)；
详细信息

  • 中图分类号: R392.116

    摘要
  • 摘要: 目的通过胶体金探针标记乙肝病毒（HBV）全基因转染的人胎盘滋养细胞（HPT-8-HBV）,示踪乙肝表面抗原（HBsAg）在HPT-8-HBV细胞中的分布。方法通过脂质体介导的方法将HBV全基因转染HPT-8细胞,G418筛选,通过ELISA、免疫组化对转染细胞进行检测;采用胶体金标记的HBsAg单克隆抗体作为探针（简称胶体金探针）对转染细胞中的HBsAg进行标记示踪。结果成功将质粒pcDNA3-3HBV转染到HPT-8,转染后第1、2代培养上清ELISA检测显示HBsAg阳性,免疫组化检测第2代转染细胞中HBsAg阳性;通过胶体金探针标记发现HBsAg存在于转染滋养细胞中的粗面内质网、分泌泡、空泡和溶酶体内,以及细胞膜和绒毛上。结论可以从重组质粒pcDNA3-3HBV转染的滋养细胞的树脂切片中获得HBsAg的超微结构定位。
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