MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究

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MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究

汪千力, 居丽雯, 蒋露芳, 蔡韵, 高颖阳, 姜庆五

文章导航 > 中华疾病控制杂志 > 2012 > 16(10): 827-832

汪千力, 居丽雯, 蒋露芳, 蔡韵, 高颖阳, 姜庆五. MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究[J]. 中华疾病控制杂志, 2012, 16(10): 827-832.

引用本文:

汪千力, 居丽雯, 蒋露芳, 蔡韵, 高颖阳, 姜庆五. MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究[J]. 中华疾病控制杂志, 2012, 16(10): 827-832.

汪千力, 居丽雯, 蒋露芳, 蔡韵, 高颖阳, 姜庆五. MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究[J]. 中华疾病控制杂志, 2012, 16(10): 827-832.

引用本文:

汪千力, 居丽雯, 蒋露芳, 蔡韵, 高颖阳, 姜庆五. MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究[J]. 中华疾病控制杂志, 2012, 16(10): 827-832.

MDCK、HEp-2、Vero细胞混合冻存适用于分离培养常见病毒研究

1. 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室,公共卫生安全教育部重点实验室
2. 上海市闵行区疾病预防控制中心

基金项目: “十一五”国家科技重大专项（2009ZX10004-104）；上海市科委资助项目(09DZ1906605)；

中图分类号: R446.5
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出版历程

摘要: 目的建立犬肾细胞（MDCK）、人喉表皮癌细胞（HEp-2）和非洲绿猴肾细胞（Vero）3种细胞（MHV）混合细胞瓶冻存复苏方法,经冻存复苏的混合细胞用于分离常见呼吸道和肠道病毒,建立病毒性病原检测的方法学平台。方法对数生长期的MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8%二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DM-SO）冷冻保存液中,液氮经冻存4个月后复苏并进行细胞计数;在复苏后0 h、24 h和48 h倒置显微镜下观察细胞形态、细胞汇合;并用于分离培养常见呼吸道、肠道病毒,观察致细胞病变效应,采用直接与间接免疫荧光法鉴定。结果在液氮中保存4个月的MHV混合细胞,细胞复苏存活率超过99.20%,镜下细胞折光度好,细胞形态良好,均见到相应的致细胞病变效应和免疫荧光检测阳性结果。结论 MDCK、HEp-2和Vero细胞等量保存在含8%DM-SO冷冻保存液中液氮保存4个月复苏存活率高。混合细胞直接冻存复苏方法建立,为常见的病毒性病原分离培养提供了宽泛的合适细胞宿主,保证了病毒性传染病的快速诊断、实验室病毒性传染病监测的可操作性。
- 上皮样细胞 /
- 肠道病毒感染 /
- 传染病

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